(Flow cytometry, FCM) se yon analizè selil ki mezire entansite fliyoresans makè selil tache. Li se yon teknoloji gwo teknoloji devlope ki baze sou analiz ak klasman selil sèl. Li ka byen vit mezire ak klasifye gwosè, estrikti entèn, ADN, RNA, pwoteyin, antijèn ak lòt pwopriyete fizik oswa chimik selil yo, epi li ka baze sou koleksyon klasifikasyon sa yo.
Sitomèt koule sitou konsiste de senk pati sa yo:
1 Chanm koule ak sistèm fluidics
2 Lazè limyè sous ak gwo bout bwa mete sistèm
3 sistèm optik
4 Elektwonik, depo, ekspozisyon ak analiz sistèm
5 Sistèm klasman selilè
Pami yo, eksitasyon lazè nan sous limyè lazè a ak sistèm fòme gwo bout bwa se mezi prensipal siyal fluoresans nan sitometri koule. Entansite limyè eksitasyon an ak tan ekspoze a gen rapò ak entansite siyal fluoresans lan. Lazè se yon sous limyè aderan ki ka bay yon sèl longèdonn, gwo entansite, ak gwo estabilite ekleraj. Li se sous limyè eksitasyon ideyal pou satisfè kondisyon sa yo.
Gen de lantiy silendrik ant sous lazè a ak chanm koule a. Lantiy sa yo konsantre yon reyon lazè ak yon koup transvèsal sikilè ki soti nan sous lazè a nan yon gwo bout bwa eliptik ki gen yon koup transvèsal ki pi piti (22 μm × 66 μm). Enèji lazè nan gwo bout bwa eliptik sa a distribye dapre yon distribisyon nòmal, asire entansite ekleraj konsistan pou selil ki pase nan zòn deteksyon lazè a. Nan lòt men an, sistèm optik la konsiste de plizyè seri lantiy, pinholes, ak filtè, ki ka apeprè divize an de gwoup: en ak en nan chanm koule a.
Sistèm optik la devan chanm koule a konsiste de yon lantiy ak pinhole. Fonksyon prensipal lantiy la ak pinhole (anjeneral de lantiy ak yon pinhole) se konsantre reyon lazè a ak yon koup transvèsal sikilè ki emèt pa sous lazè a nan yon gwo bout bwa eliptik ak yon koup transvèsal ki pi piti. Sa a distribye enèji lazè a dapre yon distribisyon nòmal, asire entansite ekleraj konsistan pou selil atravè zòn deteksyon lazè a epi minimize entèferans ki soti nan limyè ki pèdi.
Gen twa kalite prensipal filtè:
1: Filtè pase long (LPF) - sèlman pèmèt limyè ak longèdonn ki pi wo pase yon valè espesifik pase nan.
2: Short-pass filter (SPF) - sèlman pèmèt limyè ak longèdonn ki anba a yon valè espesifik pase nan.
3: Filtre Bandpass (BPF) - sèlman pèmèt limyè nan yon seri longèdonn espesifik pase nan.
Konbinezon diferan nan filtè ka dirije siyal fliyoresans nan diferan longèdonn nan tib fotomultiplikatè endividyèl (PMTs). Pou egzanp, filtè pou detekte fliyoresans vèt (FITC) devan PMT yo se LPF550 ak BPF525. Filtè yo itilize pou detekte fliyoresans zoranj-wouj (PE) devan PMT yo se LPF600 ak BPF575. Filtè yo pou detekte fluoresans wouj (CY5) devan PMT a se LPF650 ak BPF675.
Sitometri koule se sitou itilize pou klasman selil yo. Avèk avansman nan teknoloji òdinatè, devlopman nan iminoloji ak envansyon nan teknoloji monoklonal antikò, aplikasyon li yo nan byoloji, medikaman, famasi ak lòt jaden yo ap vin de pli zan pli gaye toupatou. Aplikasyon sa yo gen ladan analiz dinamik selil, apoptoz selil, sezisman selil, dyagnostik timè, analiz efikasite dwòg, elatriye.
Tan pòs: 21-Sep-2023
