(Sitometri koule, FCM) se yon analizè selilè ki mezire entansite fliyoresans makè selilè ki gen koulè. Li se yon teknoloji avanse ki devlope baze sou analiz ak klasman selil endividyèl. Li ka byen vit mezire ak klase gwosè, estrikti entèn, ADN, ARN, pwoteyin, antijèn ak lòt pwopriyete fizik oswa chimik selil yo, epi li ka baze sou koleksyon klasifikasyon sa yo.
Sitomèt koule a konsiste sitou de senk pati sa yo:
1 Chanm koule ak sistèm fluidik
2 sous limyè lazè ak sistèm pou fòme gwo bout bwa
3 Sistèm optik
4 Sistèm elektwonik, depo, ekspozisyon ak analiz
5 Sistèm klasman selilè
Pami yo, eksitasyon lazè nan sous limyè lazè a ak sistèm fòmasyon gwo bout bwa a se prensipal mezi siyal fluoresans nan sitometri koule. Entansite limyè eksitasyon an ak tan ekspozisyon an gen rapò ak entansite siyal fluoresans lan. Lazè se yon sous limyè koeran ki ka bay yon ekleraj yon sèl longèdonn, gwo entansite, ak gwo estabilite. Li se sous limyè eksitasyon ideyal la pou satisfè egzijans sa yo.
Gen de lantiy silendrik ant sous lazè a ak chanm koule a. Lantiy sa yo konsantre yon reyon lazè ak yon seksyon sikilè ki emèt soti nan sous lazè a nan yon reyon eliptik ak yon seksyon ki pi piti (22 μm × 66 μm). Enèji lazè ki nan reyon eliptik sa a distribye dapre yon distribisyon nòmal, sa ki asire yon entansite ekleraj konsistan pou selil ki pase nan zòn deteksyon lazè a. Yon lòt bò, sistèm optik la konsiste de plizyè seri lantiy, twou zegwi, ak filtè, ki ka divize an de gwoup: an amont ak an aval chanm koule a.
Sistèm optik ki devan chanm koule a gen ladan l yon lantiy ak yon twou zepeng. Fonksyon prensipal lantiy la ak twou zepeng lan (anjeneral de lantiy ak yon twou zepeng) se pou konsantre reyon lazè a ak yon seksyon sikilè ki emèt pa sous lazè a nan yon reyon eliptik ak yon seksyon ki pi piti. Sa distribye enèji lazè a dapre yon distribisyon nòmal, pou asire yon entansite ekleraj konsistan pou selil yo atravè zòn deteksyon lazè a epi minimize entèferans ki soti nan limyè ki pèdi.
Gen twa kalite prensipal filtè:
1: Filtè pas long (LPF) - sèlman pèmèt limyè ki gen longèdonn ki pi wo pase yon valè espesifik pase.
2: Filtè pas kout (SPF) - sèlman pèmèt limyè ki gen longèdonn anba yon valè espesifik pase.
3: Filtè pas-band (BPF) - sèlman pèmèt limyè nan yon seri longèdonn espesifik pase.
Diferan konbinezon filtè ka dirije siyal fluoresans nan diferan longèdonn nan tib fotomiltiplikatè endividyèl (PMT). Pa egzanp, filtè pou detekte fluoresans vèt (FITC) devan PMT yo se LPF550 ak BPF525. Filtè yo itilize pou detekte fluoresans wouj-zoranj (PE) devan PMT a se LPF600 ak BPF575. Filtè pou detekte fluoresans wouj (CY5) devan PMT a se LPF650 ak BPF675.
Sitometri koule a sitou itilize pou klasman selilè. Avèk avansman teknoloji enfòmatik, devlopman imunoloji ak envansyon teknoloji antikò monoklonal, aplikasyon li yo nan byoloji, medsin, famasi ak lòt domèn ap vin pi laj. Aplikasyon sa yo enkli analiz dinamik selilè, apoptoz selilè, tipifikasyon selilè, dyagnostik timè, analiz efikasite dwòg, elatriye.
Dat piblikasyon: 21 septanm 2023
