(Flow sitometri, FCM) se yon analyser selil ki mezire entansite a fluoresans nan makè selil tache. Li se yon teknoloji gwo teknoloji devlope ki baze sou analiz la ak klasman nan selil sèl. Li ka byen vit mezire ak klasifye gwosè a, estrikti entèn, ADN, RNA, pwoteyin, antèn ak lòt pwopriyete fizik oswa chimik nan selil yo, epi yo ka baze sou koleksyon an nan klasifikasyon sa yo.
Cytometer koule sitou konsiste de senk pati sa yo:
1 Flow Chamber and Fluidics System
2 sous limyè lazè ak sistèm mete gwo bout bwa
3 sistèm optik
4 elektwonik, depo, ekspozisyon ak sistèm analiz
5 sistèm klasman selil
Pami yo, eksitasyon lazè nan sous la limyè lazè ak sistèm fòme gwo bout bwa se mezi prensipal la nan siyal fluoresans nan sitometri koule. Entansite a nan limyè a eksitasyon ak tan an ekspoze yo ki gen rapò ak entansite a nan siyal la fluoresans. Lazè se yon sous limyè aderan ki ka bay sèl-longèdonn, gwo entansite, ak wo-estabilite ekleraj. Li se sous la ideyal eksitasyon limyè satisfè kondisyon sa yo.
Gen de lantiy silendrik ant sous lazè a ak chanm lan koule. Lantiy sa yo konsantre yon gwo bout bwa lazè ak yon sikilè kwa-seksyon ki emèt nan sous la lazè nan yon gwo bout bwa eliptik ak yon pi piti kwa-seksyon (22 μm × 66 μm). Se enèji nan lazè nan sa a gwo bout bwa eliptik distribye dapre yon distribisyon nòmal, asire konsistan entansite ekleraj pou selil pase nan zòn nan deteksyon lazè. Nan lòt men an, sistèm nan optik konsiste de kouche miltip nan lantiy, pinholes, ak filtè, ki ka apeprè divize an de gwoup: en ak en nan chanm lan koule.
Sistèm optik la devan chanm koule a konsiste de yon lantiy ak pinhole. Fonksyon prensipal la nan lantiy la ak pinhole (anjeneral de lantiy ak yon twou) se yo konsantre gwo bout bwa a lazè ak yon sikilè kwa-seksyon ki emèt pa sous la lazè nan yon gwo bout bwa eliptik ak yon pi piti kwa-seksyon. Sa a distribye enèji nan lazè dapre yon distribisyon nòmal, asire konsistan entansite ekleraj pou selil atravè zòn nan deteksyon lazè ak minimize entèferans soti nan limyè pèdi.
Gen twa kalite prensipal nan filtè:
1: Long Pass Filter (LPF) - Se sèlman pèmèt limyè ak longèdonn ki pi wo pase yon valè espesifik yo pase nan.
2: kout -pase filtre (SPF) - sèlman pèmèt limyè ak longèdonn anba a yon valè espesifik yo pase nan.
3: Bandpass filtre (BPF) - sèlman pèmèt limyè nan yon seri longèdonn espesifik yo pase nan.
Diferan konbinezon nan filtè ka dirije siyal fluoresans nan longèdonn diferan nan tib fotomultiplier endividyèl (PMTs). Pou egzanp, filtè pou detekte fluoresans vèt (FITC) nan devan PMT yo se LPF550 ak BPF525. Filtè yo itilize yo detekte zoranj-wouj fluoresans (PE) nan devan PMT a yo se LPF600 ak BPF575. Filtè yo pou detekte fluoresans wouj (Cy5) devan PMT a se LPF650 ak BPF675.
Se sitometri koule sitou itilize pou klasman selil. Avèk avansman nan teknoloji òdinatè, devlopman nan iminoloji ak envansyon nan teknoloji monoclonal antikò, aplikasyon li yo nan byoloji, medikaman, famasi ak lòt jaden yo ap vin de pli zan pli toupatou. Aplikasyon sa yo gen ladan analiz dinamik selil, apoptoz selil, sezisman selil, dyagnostik timè, analiz efikasite dwòg, elatriye.
Post tan: SEP-21-2023
